导读

● BEL-7402、BEL-7404细胞株与上篇所述的SMMC-7721情况一样，也是70年代由国内实验室建系。最初的BEL-7402、BEL-7404，不仅帮助我们阐明了人肝癌细胞的生物学特性，也为肝癌治疗、其他相关研究提供了一个理想的肝癌实验模型。

（图片来源：ICLAC Database）

● 随着在国内实验室中广泛使用，由于交叉污染、标记错误等原因，致使BEL-7402、BEL-7404也被HELA污染（部分BEL-7402被HCT-8污染）。

来源

BEL-7402、BEL-7404于1974年由中国科学院上海细胞生物学研究所建立：1974年2月19日，BEL-7402从上海市中山医院一名53岁男性肝癌患者体内获得，同年7月19日，从一名69岁男性肝癌患者体内获得BEL-7404。两名患者术前AFP测定均为阳性, 病理学诊断为原发性肝细胞癌。两株细胞株分别历时14、7天后，组织小块周围开始长出细胞，初期细胞形态均先是上皮样细胞，继有梭形细胞。第三代传代培养后，均每隔6-7天即可传代一次。

BEL-7402、BEL-7404细胞形态都是以多边形上皮样细胞占绝大多数（第三次传代以后）；此外，两者的细胞异种接种长瘤率都非常高，细胞AFP测定均为阳性，乳酸脱氢酶(LDH)同工酶分析也符合临床人体肝癌的特征，即M型同功酶的酶活力低于H型。

我们发现BEL-7402、BEL-7404被HELA污染，经历了与SMMC-7721一样的过程：2010年之前，SCI期刊未要求作者须提交细胞株鉴定报告，因此国内科研人员进行基础研究及文章投稿时，无鉴定细胞株的意识，这间接导致了被污染及实验室间的进一步扩散；2010年后，细胞株鉴定被SCI主流杂志、相关权威机构真正重视后，BEL-7402、BEL-7404相继被发现存在交叉污染的现象。有文献也显示：部分BEL-7402被HCT-8污染。

（图片来源：ExPASy Database）

还是2015年Fang Ye等人在FASEB J.上的那篇文章，报道了BEL-7402细胞株已经被污染：380个样本中有两株分别来源于不同实验室的BEL-7402，分型数据提示，一株与HELA的STR数据一致，另一株则与HCT-8一致。两年后，Xiaocui Bian等人对国内482株人源肿瘤细胞的交叉污染调查中，进一步验证了BEL-7402被HELA污染。同年，PLoS One及J Hepatol的两篇文章报道了BEL-7404被HELA污染（两篇文章也都揭示了BEL-7402被HELA污染）。ExPASy数据库对两株细胞株信息都作出明确提示：Problematic cell line: Contaminated, Shown to be a HeLa derivative。在ICLAC的The Register of Cross-Contaminated/Misidentified Cell Lines中，两株细胞株也都被收录进去（Registration ID分别为ICLAC-00549、ICLAC-00550）。

（图片来源：Fang Ye et al., 2015）

（图片来源：Yaqing Huang et al., 2017）

截止目前，鉴达受理的BEL-7402、BEL-7404分别为16株、11株。与ExPASy、DSMZ数据库重新比对确认后，实际鉴定结果显示：BEL-7402有10株为HELA，1株为HepG2，4株为HCT-8，1株为NOT Human Origin；BEL-7404有9株为HELA，2株为HuH7。

鉴达受理的BEL-7402、BEL-7404鉴定结果，同样验证了这两株细胞株被HELA、HCT-8污染的事实。

（图片来源：鉴达所受理BEL-7402、BEL-7404鉴定结果）

结合文献报道、各数据库信息及鉴达鉴定结果，对于专注肝癌方面基础研究的实验室，鉴达不推荐使用BEL-7402、BEL-7404来开展相关实验！可使用HepG2、HuH7、SK-HEP-1、Hep3B等肝癌细胞株，购买渠道最好选择权威单位。鉴达建议，不管从任何单位购买，细胞株都应第一时间进行STR鉴定，以确认其身份。

     参考文献：

      1. 陈瑞铭等,人体肝癌体外细胞株（BEL-7402）的建立及其特征,科学通报,09:434~436,1975。
      2. 陈瑞铭等,体外培养三个人体肝癌细胞系的建立及其特征,中国科学,12:1225~1233,1979。
      3. Fang Ye et al., Genetic profiling reveals an alarming rate of cross-contamination among human cell lines used in China. FASEB J. 2015 Oct;29(10):4268-72.
      4. Bian X et al., A Combination of Species Identification and STR Profiling Identifies Cross-contaminated Cells from 482 Human Tumor Cell Lines.Sci Rep.2017 Aug 29;7(1):9774.
      5. Huang Y et al., Investigation of Cross-Contamination and Misidentification of 278 Widely Used Tumor Cell Lines.PLoS One. 2017 Jan 20;12(1):e0170384.
      6. Rebouissou S et al., Note of caution: Contaminations of hepatocellular cell lines. J Hepatol. 2017 Nov;67(5):896-897.

苏州鉴达采用STR分型技术，针对人源细胞20个位点进行检测，3500型、3130XL型遗传分析仪进行毛细管电泳，与DSMZ、Cellosaurus、ATCC等数据库进行比对，出具权威英文报告，为全国近200家科研机构（高校、研究所、医院、公司）提供高质量服务，多家单位已利用鉴达细胞株鉴定服务在高水平期刊（如Clinical Cancer Research、Int J Cancer、Nature Commnications等）发表论文。

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