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BEL-7402、BEL-7404:苏州鉴达细胞株鉴定预警系列2日期:2020-03-19

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导读

BEL-7402BEL-7404细胞株与上篇所述的SMMC-7721情况一样,也是70年代由国内实验室建系。最初的BEL-7402BEL-7404,不仅帮助我们阐明了人肝癌细胞的生物学特性,也为肝癌治疗、其他相关研究提供了一个理想的肝癌实验模型。

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(图片来源ICLAC Database

随着在国内实验室中广泛使用,由于交叉污染、标记错误等原因,致使BEL-7402BEL-7404也被HELA污染(部分BEL-7402HCT-8污染)



来源

BEL-7402BEL-74041974年由中国科学院上海细胞生物学研究所建立:1974219日,BEL-7402从上海市中山医院一名53岁男性肝癌患者体内获得,同年719日,从一名69岁男性肝癌患者体内获得BEL-7404。两名患者术前AFP测定均为阳性, 病理学诊断为原发性肝细胞癌。两株细胞株分别历时147天后,组织小块周围开始长出细胞,初期细胞形态均先是上皮样细胞,继有梭形细胞。第三代传代培养后,均每隔6-7天即可传代一次。

BEL-7402BEL-7404细胞形态都是以多边形上皮样细胞占绝大多数(第三次传代以后);此外,两者的细胞异种接种长瘤率都非常高,细胞AFP测定均为阳性,乳酸脱氢酶(LDH)同工酶分析也符合临床人体肝癌的特征,即M型同功酶的酶活力低于H型。


HELA污染

我们发现BEL-7402BEL-7404HELA污染,经历了与SMMC-7721一样的过程:2010年之前,SCI期刊未要求作者须提交细胞株鉴定报告,因此国内科研人员进行基础研究及文章投稿时,无鉴定细胞株的意识,这间接导致了被污染及实验室间的进一步扩散;2010年后,细胞株鉴定被SCI主流杂志、相关权威机构真正重视后,BEL-7402BEL-7404相继被发现存在交叉污染的现象。有文献也显示:部分BEL-7402HCT-8污染。

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(图片来源:ExPASy Database

还是2015Fang Ye等人在FASEB J.上的那篇文章,报道了BEL-7402细胞株已经被污染:380个样本中有两株分别来源于不同实验室的BEL-7402,分型数据提示,一株与HELASTR数据一致,另一株则与HCT-8一致。两年后,Xiaocui Bian等人对国内482株人源肿瘤细胞的交叉污染调查中,进一步验证了BEL-7402HELA污染。同年,PLoS OneJ Hepatol的两篇文章报道了BEL-7404HELA污染(两篇文章也都揭示了BEL-7402HELA污染)。ExPASy数据库对两株细胞株信息都作出明确提示:Problematic cell line: Contaminated, Shown to be a HeLa derivative。在ICLACThe Register of Cross-Contaminated/Misidentified Cell Lines中,两株细胞株也都被收录进去(Registration ID分别为ICLAC-00549ICLAC-00550)

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(图片来源:Fang Ye et al., 2015

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(图片来源:Yaqing Huang et al., 2017

鉴达的BEL-7402、BEL-7404鉴定

截止目前,鉴达受理的BEL-7402BEL-7404分别为16株、11株。与ExPASyDSMZ数据库重新比对确认后,实际鉴定结果显示:BEL-740210株为HELA1株为HepG24株为HCT-81株为NOT Human OriginBEL-74049株为HELA2株为HuH7

鉴达受理的BEL-7402BEL-7404鉴定结果,同样验证了这两株细胞株被HELAHCT-8污染的事实。

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(图片来源:鉴达所受理BEL-7402BEL-7404鉴定结果)


结合文献报道、各数据库信息及鉴达鉴定结果,对于专注肝癌方面基础研究的实验室,鉴达不推荐使用BEL-7402、BEL-7404来开展相关实验!可使用HepG2HuH7SK-HEP-1Hep3B肝癌细胞株,购买渠道最好选择权威单位。鉴达建议,不管从任何单位购买,细胞株都应第一时间进行STR鉴定,以确认其身份。

     

     参考文献:

      1. 陈瑞铭等,人体肝癌体外细胞株(BEL-7402)的建立及其特征,科学通报,09:434~436,1975。
      2.
陈瑞铭等,体外培养三个人体肝癌细胞系的建立及其特征,中国科学,12:1225~1233,1979。
      3. Fang Ye et al., Genetic profiling reveals an alarming rate of cross-contamination among human cell lines used in China. FASEB J. 2015 Oct;29(10):4268-72.
      4. Bian X et al., A Combination of Species Identification and STR Profiling Identifies Cross-contaminated Cells from 482 Human Tumor Cell Lines.Sci Rep.2017 Aug 29;7(1):9774.
      5. Huang Y et al., Investigation of Cross-Contamination and Misidentification of 278 Widely Used Tumor Cell Lines.PLoS One. 2017 Jan 20;12(1):e0170384.
      6. Rebouissou S et al., Note of caution: Contaminations of hepatocellular cell lines. J Hepatol. 2017 Nov;67(5):896-897.


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苏州鉴达采用STR分型技术,针对人源细胞20个位点进行检测,3500型、3130XL型遗传分析仪进行毛细管电泳,与DSMZCellosaurusATCC等数据库进行比对,出具权威英文报告,为全国近200家科研机构(高校、研究所、医院、公司)提供高质量服务,多家单位已利用鉴达细胞株鉴定服务在高水平期刊(如Clinical Cancer ResearchInt J CancerNature Commnications等)发表论文。

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