在细胞培养过程中,支原体污染成为世界性问题,约有30%-60%的细胞培养物存在支原体污染。造成这种情况的原因主要有以下四点:支原体体积非常小,为0.15-0.3um,一般无法通过滤器进行去除;支原体形态多变,光学显微镜下也难以观察它的形态结构;支原体生命力顽强,可在PH7.6-8.0条件下生存,对一般抗生素不敏感;支原体污染细胞后,多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可能由于传代、换液而缓解,因此容易被忽视。
(支原体结构图 来源:ATCC)
调查发现,大约有190种可知的支原体;其中大约有二十多种支原体能够污染细胞,有的细胞株甚至会被两种以上的支原体同时污染。研究表明,污染细胞的支原体95%以上为以下8种:口腔支原体(M.orale)、精氨酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)、莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)、发酵支原体(M.fermentans)、人型支原体(M.hominis)、唾液支原体(M.salivarium)、梨支原体(M.pirum)。
(8种主要导致细胞污染的支原体 来源:ATCC)
支原体污染的来源主要包括工作环境的污染、操作者本身的污染(某些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、被污染细胞造成的交叉污染、实验器材的污染以及制备细胞的原始组织及器官的污染等。
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