24小时咨询服务热线：
0512-62806339
本文参考：ExPASy Database、ATCC Database、JCRB Database
导读
● 由于能够参与血管形成、调节血管内外大分子和炎症细胞的交换、被激活时可以产生多种活性介质，血管内皮细胞（vascular endothelial cell,VEC）成为心血管、肿瘤、炎症、免疫、药理等多学科研究的靶点。作为经典的血管内皮细胞株，HUVEC的建立为VEC相关研究提供了理想模型。
（图片来源：STR profile of HUVEC, JCRB）
● 目前ExPASy、ATCC、JCRB均收录了HUVEC的标准STR数据，ExPASy与ICLAC未将其标注为问题细胞。但鉴达的鉴定结果显示，国内的HUVEC细胞株也已经出现被污染的情况。
1984年，HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。前期收集得到的细胞团块经MCDB107培养基（含Bovine pituitary extract、FBS）重悬后，接种于覆有胶原蛋白的60-mm培养皿中，细胞汇合后胰酶消化、收集细胞。之后接种于覆有胶原蛋白的T-75培养瓶中进行第二次培养，即为HUVEC细胞株第一代。细胞形态符合人类内皮细胞形态特征，细胞呈铺路石样；Ⅷ因子相关抗原染色鉴定结果为阳性。HUVEC细胞能够在半固体培养基上生长，形成菌落。细胞无致瘤性。
2018年，Setsuko Shioda等人发现HUVEC细胞株（passage 31）在贴壁汇合时细胞与细胞之间存在间隙，这与典型的内皮细胞特征有所不同。
（图片来源：Hoshi and McKeehan, 1984）
（图片来源：Setsuko Shioda et al., 2018）
SetsukoShioda等人研究发现，HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时，24-27代的倍增时间为67个小时，27-30代的倍增时间为84个小时，32-34代的倍增时间为100个小时。培养至40代后，细胞形态出现多样化，有些细胞变大或变小，有些细胞出现多核；细胞密度下降、倍增时间延长。最后细胞在第54代停止生长，ATCC的预期寿命也显示在50-60代。
更重要的发现是，HUVEC的HHV-6（Human herpes virus 6）病毒检测呈阳性，HHV-6基因组整合到了HUVEC的9号染色体长臂的远端。不过整合区域位于亚端粒，HHV-6基因组只有一个拷贝数，因此对HUVEC细胞增殖及端粒功能未产生影响。
（图片来源：Setsuko Shioda et al., 2018）
SetsukoShioda等人对细胞株进行STR分型，其结果与数据库中HUVEC标准数据一致，不过D13S317位点会出现轻微突变——偶尔出现单个等位基因缺失的现象。
2
与NCM-460情况类似，目前HUVEC细胞株在Cellosaurus、ICLAC中未被标注、登记为问题细胞。但鉴达的HUVEC鉴定结果显示，国内可能已经不存在真正来源于Hoshi 、McKeehan建立的HUVEC细胞株。
截止目前，鉴达受理HUVEC细胞株鉴定共计22株。与ExPASy、DSMZ等数据库重新比对确认后，实际鉴定结果显示：有14株为T-24，4株为无匹配结果，2株为三种未知细胞的交叉污染（多个位点同时出现了4-6个等位基因），1株为EA.hy926，1株为非人源细胞株。
（图片来源：鉴达的HUVEC鉴定结果统计）
（图片来源：鉴达的HUVEC鉴定报告）
因此鉴达建议，国内HUVEC细胞株最好停止使用。如果从国外细胞供应商购买，也应及时进行STR鉴定，以确认其身份。
参考文献：
1. HiroyoshiHoshi, Wallace L.Mckeehan, Brain- and liver cell-derived factors are requiredfor growth ofhuman endothelial cells in serum-free culture. Proc Natl Acad Sci USA. 1984Oct;81(20):6413-7.
2. SetsukoShioda et al., The human vascular endothelial cell line HUV-EC-C harbors theintegrated HHV-6B genome which remains stable in long term culture. Cytotechnology. 2018 Feb;70(1):141-152.
苏州鉴达采用STR分型技术，针对人源细胞20个位点进行检测，3130XL型遗传分析仪进行毛细管电泳，与DSMZ、Cellosaurus、ATCC等数据库进行比对，出具权威英文报告，为全国近290家科研机构（高校、研究所、医院、公司）提供高质量服务，多家单位已利用鉴达细胞株鉴定服务在高水平期刊（如Clinical Cancer Research、Nature Commnications、Int J Cancer等）发表论文。
如需了解更多鉴达生物相关细胞株鉴定信息，可扫码关注官方公众号。将本文转发至朋友圈（至少保留三天）。添加微信或QQ客服后，将朋友圈截图发给微信或QQ客服，并备注单位及课题组（示例：XX大学XX课题组）。后期可有两次机会享七五折优惠，原价960元/株。
微信：18112556907、QQ：2791427499
标注优惠政策：
如客户在发表的高水平SCI论文（IF>8）中标注细胞株鉴定由我公司完成，我们承诺为客户免费检测两株细胞株。格式如下：The cell lines were characterized by Genetic Testing Biotechnology Corporation (Suzhou,China) using short tandem repeat (STR) markers.
Selected publications with Impact Factor >5.0 using our cell line authentication service
[1]. Ren A et al., Int J Cancer. 2019 Jul1;145(1):154-163.
[2]. Shen Y et al., Int J Cancer. 2019 Feb 1;144(3):651-664.
[3]. Xu H et al., Clin Cancer Res. 2019 Mar15;25(6):1923-1935.
[4]. Li B et al., Stem Cells. 2019 Feb 37(2):247-256.
[5]. Shi J et al., Mol Pharm. 2018 Sep4;15(9):4139-4147.
[6]. Li B et al., Oncogene. 2018 Oct 37(41):5508-5519.
[7]. Yuan Y et al., Int J Cancer. 2019 Apr1;144(7):1584-1595.
[8]. Yu J et al., J Hepatol. 2018 Jun 68(6):1214-1227.
[9]. Zhang N et al., Cell Death Differ. 2019 May 26(5):843-859.
[10]. Du L et al., Cell Death Dis. 2018 Jun18;9(7):714.
[11]. Zhou P et al., J Exp Clin Cancer Res. 2017Sep 2;36(1):115.
[12]. Wang X et al., Int J Cancer. 2017 Oct1;141(7):1422-1433.
[13]. Li Y et al., Nat Commun. 2017 Aug24;8(1):347.
[14]. Wang C et al., Carcinogenesis. 2017 Feb1;38(2):168-176.
[15]. Wang X et al., Cell Death Dis. 2016 Dec8;7(12):e2517.
[16]. Li P et al., Oncogenesis. 2017 Apr24;6(4):e322.
[17]. Du J et al., Mol Cancer Ther. 2018 Feb 17(2):419-431.
[18]. Chen L et al., Nat Commun. 2017 Jul17;8:16066.
[19]. Li H et al., Cancer Lett. 2018 Sep 28;432:121-131.
[20]. Zhang L H et al., Neuro Oncol. 2020 Jun 3;noaa138.
[21]. Ke Nie et al., Oncogenesis. 2020 May 15;9(5):51.
[22]. Li S J et al., Cancers (Basel). 2020;12(12):3864.
[23]. Zhang X L et al., Cancer Sci. 2020;111(10):3802-3812.
[24]. Hou X Y et al., Front Pharmacol. 2018;9:21.
[25]. Geng B et al., J Exp Clin Cancer Res. 2018;37(1):208.
